Бактериологический метод исследования предусматривает выделение возбудителя заболевания путем посева на плотные питательные среды, выделение чистой культуры и идентификацию возбудителей рода бордетелла до вида. Посев материала выполняется посевной Системой PREVI Isola. Высокоточная технология позволяет стандартизовать посев и повысить качество результата. Идентификация микроорганизмов осуществляется на молекулярном уровне с помощью прибора масс-спектрометр Vitek-MS. Идентификация происходит по рибосомальным белкам, которые являются уникальными маркерами каждого микроорганизма. Биоинформационное программное обеспечение сопоставляет получаемые результаты с обширной базой данных, обеспечивает надежную и точную идентификацию.
Подготовка
Биоматериал, используемый для исследования: 1) слизь с задней стенки глотки, осаждающаяся при кашле 2) слизь из носоглотки Правила отбора: до начала антибактериальной терапии, при отсутствии такой возможности — непосредственно перед повторным введением (приемом) препаратов; забор производят натощак или через 2-3 ч после приема пищи. Забор материала с задней стенки глотки заднеглоточным тампоном рекомендуется производить двумя тампонами. Медицинский работник левой рукой фиксирует с помощью шпателя корень языка, а правой вводит каждый тампон в полость рта, продвигая его за корень языка. Тампон не должен касаться слизистой щек, языка и миндалин. Кончиком тампона и выпуклой его частью касаются задней стенки глотки, проводя по ней справа налево 2 — 3 раза. Затем также осторожно, над шпателем, извлекают тампон из полости рта. Если ребенок проявляет признаки беспокойства, то стоящий за его спиной помощник сзади фиксирует голову. Материал с первого тампона сразу засевают на 2 чашки Петри с питательной средой. Второй тампон помещают в пробирку с транспортной средой. Забор материала с задней стенки глотки «кашлевыми пластинками». Сбор материала производят на 2 чашки с питательной средой. Во время приступа кашля левой рукой снимают крышку чашки, а правой подносят ее ко рту на расстоянии 10 — 12 см так, чтобы капельки слизи из дыхательных путей попали на поверхность среды. Чашку в таком положении держат некоторое время (в течение 6 — 8 кашлевых толчков). При непродолжительном покашливании можно эту чашку поднести повторно. На питательную среду не должны попадать слюна, рвотные массы, мокрота. Затем чашку с питательной средой закрывают крышкой и доставляют в лабораторию. Забор слизи из носоглотки отбирают носоглоточным тампоном или путем аспирации. Взятие может производиться только специально обученным персоналом. Мазки со слизистой носоглотки берут сухим стерильным назофарингеальным велюр-тампоном на пластиковом аппликаторе. Зонд вводят легким движением по наружной стенке носа на глубину 2 — 3 см до нижней раковины, слегка опускают книзу, вводят в нижний носовой ход под нижнюю носовую раковину до носоглотки, делают вращательное движение и удаляют вдоль наружной стенки носа. Общая глубина введения зонда должна составлять примерно половину расстояния от ноздри до ушного отверстия (3 — 4 см для детей и 5 — 6 см для взрослых). Хранение и транспортировка: при транспортировании следует оберегать материал от прямых солнечных лучей, сохраняя его при температуре 35 — 37 °C. Доставка должна занимать не более 2 — 4 ч; в транспортной среде материал может храниться при комнатной температуре до 72 часов.
Показания
Лабораторные исследования проводят с диагностической целью и по эпидемическим показаниям: 1) С диагностической целью: детям, кашляющим в течение 7 дней и более, независимо от указаний на контакт с больным коклюшем; детям с подозрением на коклюш и коклюшеподобные заболевания по клиническим данным; взрослым с подозрением на коклюш и коклюшеподобные заболевания, работающим в родильных домах, детских больницах, санаториях, детских образовательных учреждениях и школах, в т.ч. закрытого типа; исследование следует проводить двукратно ежедневно или через день в ранние сроки заболевания (не позднее 3-й недели болезни). В более поздние сроки высеваемость резко снижается. 2) По эпидемическим показаниям (лицам, бывшим в контакте с больным): детям, посещающим детские образовательные учреждения, находящимся в детских больницах, санаториях, в которых были выявлены больные коклюшем/паракоклюшем, а также всем детям до 14 лет, общавшимся с больным коклюшем/паракоклюшем в домашних условиях;взрослым, работающим в указанных выше детских учреждениях, при выявлении в них больных коклюшем/паракоклюшем, а также при общении с больным коклюшем/паракоклюшем в домашних условиях.
